ELISA試劑盒的溫育常選用的溫度有43℃、37℃、室溫文4℃等。37℃是試驗室中常用的保溫溫度,也是大多數抗原抗體結合的適宜溫度。在樹立ELISA方法作反響動力學研究時,試驗標明,兩次抗原抗體反響一般在37℃經1~2小時,產品的生成可達高峰。為加快反響,可進步反響的溫度,有些試驗在43℃進行,但不宜選用更高的溫度。但因所需時刻太長,在ELISA試劑盒中一般不予選用。
ELISA試劑盒實踐進程操作技巧:
1)加樣器應筆直參加標本,防止刮擦包被板底部,加樣進程中防止液體外濺,血清殘留在反響孔壁上。
2)加樣器吸頭要清洗干凈,防止污染,加樣次第要與說明書共同,否則可導致成果過錯,試驗重復性差。
3)在進行試驗前應對試驗的物理參數有充沛的了解,如環(huán)境溫度、反響孵育溫度和孵育時刻、洗刷的次數等,要先檢查水育箱溫度,ELISA試劑盒是否符合要求。
4)顯色液量不行過多,加樣的工作環(huán)境不能處于陽光直射的環(huán)境下,加顯色體系后要避光反響,顯色液量不能過多,防止顯色過強。
5)要確保加液量共同,在使用時感覺滴瓶加液不如加樣器好,滴瓶不易控制加液量禁絕,造成顯色不一致,判別過錯。